紫外及可见光分光光度计的可测波长范围为200一1000 nm，也有波长范围为200- 400 nm的紫外分光光度计，但前者较为普遍。紫外及可见光分光光度计的构造原理与可见光分光光度计(如721型分光光度计)相似。由于玻璃吸收紫外光，因此单色器要用石英棱镜或光栅。
(一)光(light source)
有钨丝灯及氢灯(或氛灯)两种。可见光区(360一1000 nm)使用钨丝灯;紫外光区 (200一360 nm)则用氢灯或氛灯。
(二)吸收池(absorption cell)
由于玻璃吸收紫外光.吸收池要用石英材质。
(三)检浏器(detector)
检侧器使用两只光电管，一为氧化艳光电管，用于625一1000 nm波长范围;另一只是锑艳光电管，用于200一625 nm波长范围。光电倍增管亦为常用的检测器，其灵敏度比一般的光电管高2个数量级。
紫外及可见光分光光度计分单光束和双光束型。单光束型仪器使用前一般需要预热以使仪器稳定，缺点是难以消除与补偿由于光源与电子测量系统不稳定等所引致的误差。双光束型仪器能够消除与补偿由于光源、电子测量系统不稳定等所引致的误差，所以其测盘的度就提高了。
其工作原理可描述为:由光源(钨丝灯氘灯，根据波长而变换使用)发出的光经人口狭缝及反射镜反射至石英棱镜或光栅，色散后经过出口狭缝而得到所需波长的单色光束。然后由反射镜反射至由马达转动的调制板及扇形镜上。当调制板以一定转速旋转时，时而使光束通过，时而挡住光束，因而调制成一定频率的交变光束。之后扇形镜在旋转时，将此交变光束交替地投射到参比溶液(空白溶液)及试样溶液上，后面的光电倍增管接受通过参比溶液及为试样溶液所减弱的交变光通量，并使之转变为测量信号。此信号经放大并用解调器分离及整流，然后以电位器自动平衡此两直流信号的比率，并依照记录器记录得到吸收曲线。